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Product CenterTHP-1(人單核細胞白血病細胞)
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THP-1(人單核細胞白血病細胞)系是1980年Tsuchiya等人建立的人單核細胞白血病細胞系。它來自一位急性單核細胞白血病患者的血液,有分化為多種巨噬細胞的能力,是各領域研究常用的細胞系之一。
THP-1(人急性單核細胞白血病細胞)是人外周血的單核細胞系,最初來源于急性單核細胞性白血病患者。屬于懸浮細胞,適合用于轉染或感染實驗。其表面抗原HLA型為:A2,A9,B5,DRw1,DRw2。
細胞培養信息:
細胞名稱:THP-1(人單核細胞白血病細胞)
細胞別稱:THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); Tohoku Hospital Pediatrics-1
生長特性: 懸浮
培養條件: RPMI-1640+10% FBS
培養環境: 空氣,95%;二氧化碳 (CO2),5%
細胞檢測:
實驗室分離的人單核細胞白血病(THP-1)細胞經鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
THP-1細胞培養注意事項
● THP-1細胞懸浮圓形生長,偶有小聚團,屬于正常現象,無需吹散;
● 圓形透亮、細胞膜完整的細胞是活細胞,如果無法判斷,可以取少量細胞用臺盼藍染色后計數確定細胞活率;
● 少量細胞附著瓶底屬于正常現象,可將懸浮細胞轉移至新瓶,丟棄貼壁的細胞;
● THP-1喜歡偏酸環境,培養基呈橘色時可不用換液,補充適量新鮮培養基維持一天再進行換液或傳代操作;
● THP-1有密度依賴性,密度低時生長較慢,培養密度維持在30萬-100萬細胞/mL之間為宜,超過80萬細胞/mL即可傳代;
● THP-1復蘇后恢復較慢,如無特殊情況,復蘇后48小時內不對細胞進行操作;
● THP-1生長需要穩定的環境,不頻繁拿出培養箱,不頻繁離心;
● 培養時瓶子豎立放置(瓶蓋朝上),可增加細胞局部密度,促進細胞增殖。
● β-巰基乙醇可以消除活性氧自由基,維持細胞高密度生長。若培養基中不添加β-巰基乙醇,長期培養細胞可能會出現大量貼壁,嚴重聚團等情況。
細胞到貨須知
1. 請客戶收到本公司原代細胞產品后,立即對物品包裝、細胞培養瓶等拍照,如有疑問或問題,須在24小時內通知本公司,提供照片和書面說明。客戶收到非凍存原代細胞后,用75%酒精擦拭瓶身,再將原裝的原代細胞瓶放入細胞培養箱內培養,1-4小時后再使用,吸取瓶中培養液,換6ml完Q培養液。注意觀察細胞情況,待貼壁率達到90%以上再按傳代說明操作。請客戶使用T25細胞瓶傳代,一瓶傳二瓶。
2. 謹記:培養原代細胞前三天,需對原代細胞生長狀態進行拍照并注明和標記時間。若原代細胞培養生長存在質量問題,需向本公司提供原代細胞培養生長的照片和書面說明。請客戶使用原代細胞第3代以內。原代細胞培養傳代過多,可能造成原代細胞的質量問題。
細胞培養
1.顧客收到T25瓶裝的細胞如果沒長滿,建議先放培養箱2-4小時
2.吸去培養液,取部分放入50ml離心管,放置于培養箱(放2-3天,觀察是否有污染)
3.加PBS清洗1-2遍,去PBS。加6ml完Q培養基放培養箱繼續培養。1-2天換一次液(如果培養液變黃,必須盡快換液)
細胞傳代
1.細胞密度到達90%,可以進行傳代。
2.吸去培養液,加PBS清洗1-2遍,去PBS。加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒,
3.加12ml完 Q培養基,吹打均勻,即可分到2個T25培養瓶里。(原代細胞1傳2,若顧客使用培養皿或培養孔板,建議先包被)
細胞凍存
1.選擇指數生長期的細胞,吸去培養液,加PBS清洗1-2遍。去PBS,加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒,去胰酉每。將培養瓶放37度培養箱,靠殘余胰酉每繼續消化細胞直至細胞變圓,拍打瓶側使細胞脫落。
2.加1-1.5ml成品凍存液(本公司有賣的,無血清低DMSO,無需程序凍存),分裝至2ml凍存管里,放-80度冰箱過夜。第二天再轉至液氮
細胞復蘇
1.從液氮罐取凍存管,凍存管放置37度水浴鍋1min,至凍存液融解。
2.在超凈臺將凍存液吸取至T25培養瓶,再加入10-15ml完Q培養基
3.第二天換6ml完Q培養液即可